魚(yú)ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區(qū)分客觀(guān)等要素,適宜于大規(guī)模篩查實(shí)驗(yàn)又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查,能夠做定性實(shí)驗(yàn)也能夠做定量分析。
魚(yú)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
魚(yú)ELISA試劑盒操作技術(shù)優(yōu)勢(shì):
1.操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說(shuō)明書(shū)一起,否則可導(dǎo)致效果過(guò)錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說(shuō)明書(shū)舉薦的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)停留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問(wèn)污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4.要保證加液量一起 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不一致,判別過(guò)錯(cuò)。
5.顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過(guò)多,避免顯色過(guò)強(qiáng)。